薄层色谱法原理

发布者:admin 发布时间:2019-10-27 13:34 浏览次数:

  薄层色谱法原理_化学_自然科学_专业资料。薄层色谱法 thin layer chromatography,TLC 第一节 薄层色谱法的基本原理 ? 定义:薄层色谱法是将被分离的试样 溶液点在薄层板的一端,再用溶剂把 试样展开,从而使试

  薄层色谱法 thin layer chromatography,TLC 第一节 薄层色谱法的基本原理 ? 定义:薄层色谱法是将被分离的试样 溶液点在薄层板的一端,再用溶剂把 试样展开,从而使试样组分分离。 ? 分型:吸附薄层色谱、分配薄层色谱 法、离子交换薄层色谱法、凝胶色谱 等。 (一)薄层色谱法的原理 将一定粒度的吸附剂 均匀地涂铺在表面光 洁的玻璃板或塑料平 板上,制成薄层板。 把待分析试样的溶液滴 加在薄层板的起始线 上(点样) 薄层板 原点 试样 把薄层板放入层析缸中,底端浸入适当溶剂。 前沿 ? 展开过程中,组分在 两相之间发生多次吸 附—解吸平衡,吸附 牢的组分随展开剂移 动慢,吸附弱的组分 随展开剂移动快,一 段时后,组分被分离, 各组分在薄层板上形 成不同距离的斑点。 原点 A B 比移值Rf 溶剂 前沿 原点到斑点中心的距离 Rf ? 原点到溶剂前沿的距离 c a b a R f ? R c st b ? c 起始线 AA BB Rf值相差越大,分离越好。一般要求分 离后组分的Rf值在0.2~0.8之间,各组 分的Rf值之差应大于0.05,以防斑点重 叠。 (二)固定相和流动相 ? 1、固定相(吸附剂) ? 常用的吸附剂:硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭和大孔吸 附树脂等。 ? 吸附剂的选择要合适,与流动相、被分离化合物不反应 ? 2、流动相(展开剂) 薄层色谱法中采用单一溶剂或多元 混合溶剂作流动相,称为展开剂。 与吸附柱色谱法中选择流动相的一 般规则相同,展开剂的选用要从被分 离试样组分极性、吸附剂活性和展开 剂的极性三个因素综合考虑。 吸附剂和展开剂的选择 ? 对于极性较小的被分离试样组分,应 选用活性较强的吸附剂,极性较小的 展开剂; ? 对于极性较大的被分离试样组分,应 选用活性较弱的吸附剂,极性较大的 展开剂。 被分离试样组分极性、吸附剂活性和展开剂极性之 间的关系 活泼 Ⅰ C’ B C 极性 吸附剂 (固定相) 展开剂 (流动相) 不活泼 B’ Ⅴ A’ A 非极性 非极性 被分离物质 极性 展开剂成分的选择: 对于容易分离的化合物,用单一溶剂展 开 优点:溶剂简单,分离重现性好。 对于难分离组分,则选用二元、三元、 甚至多元溶剂 Rf太小——加入强极性展开剂 Rf过大——降低展开剂的极性 优化 1.占比例较大的溶剂为主要溶剂,可使 试样组分溶解并基本分离。 占比例较小的溶剂可进一步调整各组 分Rf值,改善分离效果。 2.分离酸性或碱性组分时,往往在展开 剂中加入少量酸或碱,以防这些组分 离解,使这些组分的斑点更加集中和 清晰,从而提高分离度。 3.当展开剂的粘度太大时,可在展开剂 中加入粘度小的溶剂,以降低展开剂 粘度,从而提高展开速度。 谢谢 thank you 谢谢观赏 WPS Office Make Presentation much more fun @WPS官方微博 @kingsoftwps


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